Тилозин активен в отношении большинства грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, в том числе стрептококков, лептоспир, коринебактерий, клостридий, эризипелотриксов, пастерелл, хламидий, трепонем хиодизентерии, спирохет и микоплазм.
При внутримышечном введении антибиотик быстро распределяется по организму и достигает максимальных концентраций в тканях примерно через 1 час после введения. Терапевтический уровень антибиотика в тканях сохраняется не менее 20 часов. Выводится из организма преимущественно с мочой, а у лактирующих животных - и с молоком.